C - 01 Základní informace o odběrech primárních vzorků

Za správný odběr materiálu si ručí žadatel. Popis možného odběrového systému je uveden v Příloze 1 tohoto dokumentu.

Odběrová místa dle žadatele

Odběr biologických materiálů pacientů klinických oddělení NPK provádí personál příslušného oddělení, které žádá o vyšetření nebo je odběr proveden v centrální odběrové místnosti Pardubické nemocnice.

Odběr materiálů pro účely OČTŘ (orgány činné v trestním řízení) si zajišťuje příslušný orgán sám v příslušných zdravotních zařízeních, popř. v centrální odběrové místnosti Pardubické nemocnice nebo na ambulanci traumatologického centra Pardubické nemocnice.

Odběr materiálů ze zdravotních a soudních pitev je zajišťován a prováděn soudním lékařem dle postupů SOU (oddělení soudního lékařství PKN) v rámci pitev zemřelých.

Odběr materiálů pro účely ostatních samoplátců (fyzické a právnické osoby) viz. LP-TOX F Samoplátci.

Účel odběru krve na stanovení alkoholu a návykových látek

Pro zdravotnické účely se vyšetření provádí za účelem diagnostickým (ovlivnění zdravotního stavu, dodržování léčebného režimu, podezření na intoxikaci, bezvědomí aj.) a epidemiologickým (zjišťování příčin úrazovosti).

Pro právní účely se vyšetření provádí v případech, kdy o to požádají oprávněné orgány.

Metodika a interpretace vyšetření krve a moče při požití návykových látek (NL)

Pro stopovou analýzu návykových látek v biologických vzorcích je vhodná kombinace imunochemických a chromatografických metod s hmotnostní detekcí.

Při aplikaci těchto metod je nutné dodržovat zásady správné laboratorní praxe dle doporučení mezinárodních odborných společností (např. www.tiaft.org , www.gtfch.org). Pro právní účely je dále nutnost toxikologické laboratoře splňovat podmínky personální a technické dle „Nepodkročitelných mezí pro odbornost 814 – toxikologická laboratoř“ včetně pravidelné úspěšné účasti v externím hodnocení kvality (EHK).

Imunochemické metody jsou vhodné pro získání prvotních informací o vzorku. Nejčastěji jde o záchyt vybraných skupin NL v moči. Tato vyšetření mají pouze orientační charakter, jsou zde možné interference a vyskytují se zde falešné pozitivity. Imunochemické metody nerozlišují individuální NL ve vybrané skupině. Nemají charakter kvantitativní ani semikvantitativní. Numerické výsledky z automatických analyzátorů slouží pouze k vnitrolaboratorním účelům. Interpretují se pouze jako orientační nález, popř. suspektní skupinový nález.

Chromatografické metody naproti tomu upřesňují nespecifický imunochemický záchyt. Rozlišují individuální NL ve vzorku a jednoznačně prokazují jejich přítomnost ve vzorku. Specifickými konfirmačními metodami jsou plynová popř. kapalinová chromatografie ve spojení s hmotnostní detekcí (GC-MS, popř. LC-MS). Kvalitativní vyšetření moče těmito metodami předchází kvantitativní analýzu v krvi (důvodem jsou vyšší koncentrace často neznámých nox a výskyt jejich specifických metabolitů). Vyšetření krve je již cíleně zaměřené na konkrétní návykové látky.

C - 02 Odběr biologického materiálu pro zdravotnické účely – klinická oddělení

.

Odběr krve a jiných biologických materiálů (např. moč) musí být prováděn do chemicky čistých a inertních skleněných nebo plastových odběrových zkumavek a nádob (bez separátorů, antikoagulancií, zbytků saponátů, dezinfekcí apod.) z důvodu falešné pozitivity nebo negativity vzorku.

Ethylalkohol a těkavé látky

K odběru jsou vhodné zkumavky firmy Sarstedt nebo Vacutainer s červenou zátkou, případně skleněné zkumavky řádně zajištěné proti otevření (př. zalité parafinem).

Před odběrem dezinfikovat kůži vhodným dezinfekčním prostředkem, který nesmí obsahovat alkohol ani těkavé látky.

Množství potřebné krve na stanovení etylalkoholu a jiných těkavých látek je 8 ml (plná zkumavka bez separátoru).

Léky a drogy

Pro screeningové vyšetření vybraných skupin léků a drog je potřeba odebrat moč, zvratky či první podíl výplachu žaludečního obsahu do čistých a suchých nádob. Pro moč je potřeba minimální množství 20 ml (pokud není v Příloze 1 uvedeno jinak), pro žaludeční obsah 50 ml.

Odběr krve poté slouží pro konfirmaci a případně stanovení hladiny léků a drog zachycených screeningem v moči či žaludku. Pro kvantifikaci jsou nutné dvě zkumavky srážlivé resp. nesrážlivé krve (2x 8 ml).

Pro průkaz drog v novorozenecké smolce je třeba odebrat co největší množství smolky, minimálně 2 g. Spolu se smolkou je vhodné odebrat i moč novorozence (co nejdříve po porodu) a rovněž moč matky.

Karbonylhemoglobin (COHb) a methemoglobin (MetHb)

Pro stanovení obsahu COHb a MetHb v krvi je nutný odběr nesrážlivé krve (kapilára pro analyzátor krevních plynů).

Nebiologický materiál

Po předchozí konzultaci s odpovědným pracovníkem laboratoře lze do laboratoře zaslat k analýze také tablety, prášky, neznámou tekutinu, injekční stříkačky apod.

C - 03 Odběr biologického materiálu pro právní účely – soudní oddělení (pitvy zemřelých), PČR, OČTŘ

Pro účely právní je vhodné moč odebírat pod dohledem zdravotnického pracovníka. Při lékařském vyšetření a odběru krve musí být přítomen žadatel o vyšetření.

Odběr krve a jiných biologických materiálů (např. moč) musí být prováděn do chemicky čistých a inertních skleněných nebo plastových k tomu určených odběrových zkumavek a nádob (bez separátorů, antikoagulancií, zbytků saponátů, dezinfekcí apod.) z důvodu falešné pozitivity nebo negativity vzorku.

Laboratoř přijímá vzorky biologických materiálů z SOU PKN:

· krev, moč, žaludeční obsah

· orgány jako ledviny, játra, slezina, mozek, plíce apod.

· obsah duodena či střev

· sklivec, mozkomíšní mok

Etylalkohol a těkavé látky

K odběru jsou vhodné plastové případně skleněné zkumavky řádně zajištěné proti otevření (př. zalité parafinem) a neobsahující separátory a jiné látky.

Před odběrem dezinfikovat kůži vhodným dezinfekčním prostředkem, který nesmí obsahovat alkohol ani těkavé látky.

Množství potřebné krve na stanovení etylalkoholu a jiných těkavých látek je 8 ml (plná zkumavka). Odběr se provádí zpravidla z loketní žíly.

Krevní vzorek u zemřelého se zásadně odebírá ze stehenních nebo pažních žil, event. ze splavů tvrdé pleny mozkové. Nesmí se odebírat krev z cév v okolí žaludku, ze srdce a vytékající z tělních otvorů.

Léky a drogy

K odběru jsou vhodné plastové, případně skleněné zkumavky řádně zajištěné proti otevření (př. zalité parafinem) a neobsahující separátory a jiné látky. Při podezření na užití kokainu je doporučeno odebrat krev jednak do 2 zkumavek srážlivé krve, a jednak odebrat ještě krev do odběrové zkumavky obsahující fluorid sodný (např. BD Vacutainer s šedým víčkem), který zabraňuje rozkladu této noxy.

Množství potřebné krve pro konfirmaci a případné stanovení NL je 2 x 8 ml srážlivé krve (2 plné zkumavky). Odběr se provádí zpravidla z loketní žíly.

Krevní vzorek u zemřelého se odebírá ze stehenních nebo pažních žil, event. ze splavů tvrdé pleny mozkové. Z jiných míst pouze z důvodu např. devastace těla (nutno uvést popis místa odběru a možné kontaminanty). Nejméně vhodný je odběr z cév v okolí žaludku, nelze z volně přítomné krve a vytékající z tělních otvorů.

Karbonylhemoglobin

Pro stanovení COHb je potřeba 8 ml krve zemřelého (pažní, stehenní žíla).

C - 04 Identifikace materiálu a žádanky

Materiál musí být označen:

· identifikačními daty odebrané osoby (jménem, rodným číslem, datem narození nebo jiným nezaměnitelným identifikačním znakem)

· datem a časem odběru

· názvem oddělení požadující vyšetření

V doprovodné žádance musí být uvedeno:

· jméno a příjmení pacienta

· rodné číslo nebo datum narození vyšetřované osoby či náhradní rodné číslo

· základní a ostatní diagnóza pacienta

· zdravotní pojišťovna pacienta

· titul, jméno a příjmení lékaře požadujícího vyšetření

· podpis lékaře nebo jiného žadatele organizace zodpovědné za odběr materiálů

· razítko oddělení nebo zdravotnického zařízení žadatele včetně IČZ

· datum a čas odběru

· požadovaný druh vyšetření

· požadavek na rychlost provedení vyšetření (rutina, statim)

Pro právní účely spolu s řádným označením materiálu a řádně vyplněnou Žádostí o toxikologické vyšetření je nutné vyplnit Protokol o lékařském vyšetření při ovlivnění alkoholem nebo Protokol o lékařském vyšetření při ovlivnění návykovou látkou spolu s údaji o datu a hodině odběru biologických vzorků. Protokoly se do laboratoře odesílají ve 4 vyhotoveních.

C - 05 Zacházení se vzorky a transport materiálu do laboratoře

Informace k bezpečnosti práce při manipulaci s biologickým materiálem:

Obecné zásady strategie bezpečnosti práce s biologickým materiálem jsou obsaženy v platné verzi Vyhlášky Ministerstva zdravotnictví č. 195/2005 Sb., kterou se upravují podmínky předcházení vzniku a šíření infekčních onemocnění a hygienické požadavky na provoz zdravotnických zařízení a ústavů sociální péče.

Na základě této vyhlášky byly stanoveny tyto zásady pro bezpečnost práce s biologickým materiálem:

• Každý vzorek krve je nutné považovat za potencionálně infekční.
• Žádanky ani vnější strana zkumavky nesmí být kontaminovány biologickým materiálem – důvod k odmítnutí vzorku s výjimkou unikátních vzorků, které již nelze opakovaně zajistit.
• Vzorky od pacientů s přenosným virovým onemocněním či multirezistentní nosokomiální nákazou mají být viditelně označeny.
• Vzorky jsou přepravovány v uzavřených zkumavkách, které jsou vloženy do stojánku nebo přepravního kontejneru tak, aby během přepravy vzorku do laboratoře nemohlo dojít k rozlití, potřísnění biologickým materiálem nebo jinému znehodnocení vzorku.

Všechny spolupracující subjekty jsou povinny tyto pokyny dodržovat v plném rozsahu.

Transport biologického materiálu do laboratoře:

Transport biologického materiálu z jednotlivých oddělení NPK si zajišťují oddělení v souladu s metodickými pokyny nemocnice o odběrech a transportu biologického materiálu.

Transport materiálů od ostatních subjektů je zabezpečován příslušným zdravotním zařízením, které biologický materiál odebralo nebo pověřenou osobou, která zajistí, že s materiálem nebude manipulováno. Organizace transportu je řízená ve spolupráci s laboratoří tak, aby byly dodržovány všechny podmínky preanalytické fáze.

Pro právní účely vzorky biologických materiálů pro toxikologické vyšetření je nutné neprodleně dopravit do laboratoře, aby nedošlo k jejich znehodnocení (např. hnilobou). Pokud nelze vzorky neprodleně předat, musí být uloženy v uzamčené chladničce při teplotě asi 4° C.

Podmínky transportu:

· transport musí být dostatečně rychlý bez prodlevy, aby mohla být včas zahájena

požadovaná analýza

· vzorky musí být do doručení i během transportu uchovávány v chladu

· žadatel o toxikologické vyšetření zajišťuje během transportu ochranu proti

znehodnocení mechanickými a fyzikálními podmínkami

· vzorky musí být transportovány zároveň se žádankami a případně s doprovodnou dokumentací (Protokoly)

· vzorky biologického materiálu musí být transportovány odděleně od žádanky, aby nedošlo k rozlití materiálu a případnému potřísnění žádanky biologickým materiálem

Speciální podmínky transportu:

· materiály z pitvy z SOU nutno dopravovat v uzavřeném boxu za shodných podmínek ad shora (uzavřeno odpovědným personálem na SOU a otevřeno odpovědným personálem v toxikologické laboratoři)

· vzorky od PČR, OČTR a samoplátců přijímané na SOU se musí transportovat při teplotě max. do 25°C, teplota je po dobu transportu monitorována. Pracovník SOU, který vzorky přebírá, odečte teplotu v přepravním boxu a teplotu zaznamená do příjmové knihy. Pokud je maximální povolená teplota transportu překročena, je tato skutečnost uvedena na výsledkovém protokolu.

· materiály přijaté na SOU by měly být tentýž den dopraveny do laboratoře. Pokud ne, materiál je nutno uchovat v chladničce a zaslat do laboratoře co nejdříve v následujícím pracovním dnu

· u citlivých analýz (např. alkohol, těkavé látky, některé omamné a psychotropní látky apod.) je nutné dodržet časové nároky na transport v souladu se stabilitou analytu

· vyšetření, která mají speciální požadavky na preanalytickou fázi, jsou přijaté do laboratoře pouze za předpokladu splnění těchto požadavků po předchozí dohodě s lékařem kliniky, s pitvajícím lékařem SOU a obecně s žadatelem o toxikologickou analýzu

C - 06 Chyby při odběru, manipulaci a transportu biologického materiálu

· znečištění jehly nebo pokožky dezinfekčním prostředkem

· znečištění skla, injekční stříkačky nebo jehly stopami saponátů

· nevhodné zkumavky nebo nádobky

· nedostatečné označení zkumavek nebo nádobek

· potřísnění zkumavek nebo nádobek biologickým materiálem

· prodloužení doby mezi odběrem a dodáním materiálu do laboratoře

· vystavení biologického materiálu přímému světlu, teplu, mrazu